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旭日東淺析-水處理廠細菌群落

發布時間(jiān):2019-05-22 01:47:02

本文分析了6大洲23個國家269個(gè)汙水處理(lǐ)廠的約1200個活性(xìng)汙泥16S rDNA的樣本。
結果表明,全球活(huó)性汙泥細(xì)菌群落中約(yuē)有10億個細菌表型(phylotypes),且服從泊鬆對(duì)數正態(tài)多樣性分布(Poisson log normal diversity distribution)。盡管活性汙泥具有高(gāo)度的多樣性,但存在一個全球核(hé)心細菌群落(28個OTUs)與(yǔ)活性汙泥的性能(néng)密切相關。
利用全球數據集(jí)進行(háng)meta分析表明,活性汙泥微生物群落與淡水群落的關(guān)係最為(wéi)密切。與大型生物多樣性相比(bǐ),活性汙泥細菌群落沒有明顯的緯度梯度。
群落在很大(dà)程度上受到隨機過程(分散和漂移)的驅動,群落的空間周轉率與群落規(guī)模有關。另外(wài)決定性因(yīn)素(溫度和有機物輸入)也很重要(yào)。

對於汙水處理廠微生物群落的多(duō)樣性和生物地理學的了解才剛剛開始。
作者創建了一個全球水微生物群落聯盟(GWMC)(http://gwmc.ou.edu/),其成立於2014年5月,是一個促進全球水(shuǐ)微生物研究研究和教育(yù)的國(guó)際合作和交流的平台。
在全球係統地收集和分析活性汙泥微生物群(qún)落。本文提出了五個問題:
(1)活性汙泥微生(shēng)物群落的全球多樣性程度如何?
(2)活性汙泥工藝中是否存在跨大陸的核心微生物群?
(3)活性汙泥微生物群落是否具(jù)有緯向多樣性梯度(LDG)?
(4)微生物(wù)多樣性對活性汙泥工藝的功能性重要嗎(ma)?
(5)確定性因素與隨(suí)機性因(yīn)素在調節活性汙(wū)泥微(wēi)生物群落組(zǔ)成、分布和功能方麵的相對重要性(xìng)如何?

采樣

MoBio Power Soil DNA Isolation Kits提取汙泥DNA。
515F/806R擴增16S rDNA V4區。
利用SILVA Test Prime v.1.0和(hé)SILVA132數據庫檢驗了引物覆蓋度,無錯配情況可覆蓋86.8% 細(xì)菌和52.9%的古菌
UPARSE 97%聚類OTU,共得到96148個OTU。
MiDAS database進行物種劃分。
Resample數量25600,去掉了(le)singletons。
結(jié)果


樣本和大洲水平的稀釋曲線

(1)活性汙泥微生物群落的全球多樣(yàng)性程度如何?
 

不同模型擬合物種豐度分布。泊鬆對數正態模型最優,可解釋99%的群落變化。
 

利用尺度(dù)定律估算(suàn)全球WWTP的微生物數量。
對於尺度定律(lǜ),見前文:
PNAS(2016)-尺度定律預測全球微生(shēng)物多樣性

(2)活性汙泥工藝中是否(fǒu)存在跨大陸的核心微生物群?
篩選(xuǎn)方法包含三個條件(jiàn):

overall abundant OTUs: 先計算出每(měi)個OTU在所(suǒ)有樣本中的平均相對豐度mean relative abundance (MRA)。挑出豐度 > 0.1%作為高豐度物種
ubiquitous OTUs: 在所有樣本中超過80%都出現的物種(zhǒng)定義為廣泛出現的OTU
frequently abundant OTUs:在每個(gè)樣本中序列占到(dào)80%以(yǐ)上,高豐度在超過一半(bàn)的(de)樣(yàng)本中都達(dá)標,這種物種被定義為頻繁出現的高豐度物種。

隻有滿足這三(sān)個條件,才(cái)能成為全球核心(xīn)物種。即一個特(tè)定大陸的核心OTU應該是來自該(gāi)大陸豐(fēng)度>0.1%的OTU;一個核心OTU也必須(xū)在超過(guò)80%的樣本中被檢(jiǎn)測到,並且在該大陸超過50%的樣本中占主導地位(wèi)。
 

28個核心微生物
 

核心(xīn)微生物在門水平的分布
 

根據地球微生(shēng)物(wù)群落項目確定了全球範圍內各種生態係統的核(hé)心群落。土壤、人類糞便、空(kōng)氣和淡(dàn)水微生物群落分別(bié)有9、6、2和1個OTUs被確定為核心類群。動物糞(fèn)便和海洋沒有發現核心類群,這可能是由(yóu)於群落組(zǔ)成高度可變。
 

NMDS表明活性汙泥的(de)核心群落與其(qí)他生境沒有(yǒu)重疊,說明活性汙泥選擇(zé)了一個獨特(tè)的核心群落

(3)活性汙泥微生物群落是否具有緯(wěi)向多樣性梯度(LDG)?

中緯度豐(fēng)度最高。曲線為(wéi)基(jī)於最小(xiǎo)二乘回歸的多項式擬合。顏色表示全(quán)年平均氣溫。
 

不同尺度上的DDR。

(4)微(wēi)生物多樣性(xìng)對活性汙泥工藝(yì)的功能性重要嗎?


結構方程模型(SEM)顯示了環境變量、群落組成與(yǔ)汙水處理廠功能之間的關係。藍色和紅色(sè)箭頭分(fèn)別代表(biǎo)顯著的正、負相關(guān)。群(qún)落(luò)結構有基於Bray的(de)PCoA的PC1軸代表。
SEM見前文結構方程模型(xíng)(SEM)
 

隨機森林分析檢驗了物(wù)種與溫度的相關性。紅色的對角線顯示了完美(měi)預測的理論曲線。右下角是根(gēn)據北美和(hé)南美的(de)樣本數據進行的訓練,用(yòng)於(yú)預測亞洲(zhōu)樣本的溫度。
 

環境因子之間的Spearman相關;以及群落結構與環境因子之間的partial Mantel tests.
 

(5)確定性因素與隨機性因素在調節活性汙泥微生(shēng)物群落(luò)組成、分布和功能方麵的相對重要性如何?

隨機性比(bǐ)例很高,不論計算距離的(de)方法、不(bú)論物種多樣性(xìng)還是係統發(fā)育多樣性。

基於MRM的VPA分析表明(míng)地理距離(Geo)對群落變化(huà)的作用強於(yú)環境(jìng)因子(zǐ)(Env)。
對於MRM,見前文
R——ecodist&MRM methods
SEM和(hé)VPA分析都(dōu)涉及(jí)到了向後篩選變量的過程,見前文
MRM中進行變量篩選

           

   


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